{"id":156768,"date":"2014-08-21T09:15:04","date_gmt":"2014-08-21T12:15:04","guid":{"rendered":"http:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/?p=156768"},"modified":"2017-04-10T13:45:41","modified_gmt":"2017-04-10T16:45:41","slug":"anticuerpos-para-combatir-plagas-en-el-campo","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/anticuerpos-para-combatir-plagas-en-el-campo\/","title":{"rendered":"Anticuerpos para combatir plagas en el campo"},"content":{"rendered":"
\"C\u00e9lulas

EDUARDO CESAR<\/span>C\u00e9lulas h\u00edbridas utilizadas en la producci\u00f3n de anticuerpos monoclonalesEDUARDO CESAR<\/span><\/p><\/div>\n

Dos proyectos desarrollados por una peque\u00f1a empresa de biotecnolog\u00eda de Campinas, Rheabiotech, ser\u00e1n de ayuda para el control de las enfermedades en dos importantes cultivos agr\u00edcolas de Brasil. En dichos proyectos, se est\u00e1n produciendo anticuerpos en sus laboratorios que se utilizar\u00e1n en kits<\/i> cuya finalidad consiste en diagnosticar la roya asi\u00e1tica de la soja, causada por un hongo, y tambi\u00e9n dos tipos de virus que atacan a las plantaciones de papas. La roya asi\u00e1tica de la soja es una enfermedad causada por el hongo Phakopsora pachyrhizi<\/i>, que ataca las hojas de la planta y provoca un deterioro en los granos con la consecuente ca\u00edda de la productividad. Las p\u00e9rdidas ocasionadas sumaron 25 mil millones de d\u00f3lares en el per\u00edodo de 2003 a 2013, seg\u00fan la Confederaci\u00f3n de Agricultura y Ganader\u00eda de Brasil (CNA). El control de la misma es complicado y requiere la aplicaci\u00f3n constante de funguicidas, ya que en la fase inicial de infecci\u00f3n, el hongo s\u00f3lo puede detectarse mediante un examen visual con lupa. \u201cEl problema radica en que, como s\u00f3lo se lo detecta luego de que la plantaci\u00f3n se ha infectado, nunca se sabe exactamente cu\u00e1ndo se debe aplicar el funguicida\u201d, explica el bi\u00f3logo Lu\u00eds Ant\u00f4nio Peroni, director asociado de Rheabiotech. \u201cEn funci\u00f3n de esa incertidumbre se realizan varias aplicaciones \u2012hasta seis o siete por cosecha\u2012, lo cual eleva los costos\u201d. El kit<\/em> que se est\u00e1 desarrollando en colaboraci\u00f3n con la empresa ParteCurae Analysis, de S\u00e3o Carlos, permitir\u00e1 un adelanto del diagn\u00f3stico de hasta cinco d\u00edas, antes de que la contaminaci\u00f3n se haya expandido.<\/p>\n

Su fabricaci\u00f3n comienza con la obtenci\u00f3n de anticuerpos para el hongo. Para lograrlo, se utiliza como ant\u00edgeno al micelio, que es la parte del tallo del hongo constituida por filamentos. Ese ant\u00edgeno se inocula en conejos, cuatro veces en intervalos de 15 d\u00edas, para inmunizarlos. Es decir, el organismo del conejo produce anticuerpos para combatir al ant\u00edgeno. \u201cLuego se extrae sangre del conejo, con esos anticuerpos, y de ella se obtiene el suero inmune\u201d, explica la bioqu\u00edmica argentina radicada en Brasil Fernanda \u00c1lvarez Rojas, directora asociada de Rheabiotech. \u201cDespu\u00e9s, se procede a la purificaci\u00f3n de los anticuerpos\u201d.<\/p>\n

A esos anticuerpos obtenidos se los denomina policlonales, pues son producidos por diferentes clones de linfocitos B, c\u00e9lulas integrantes del sistema inmunitario. Son una mezcla de mol\u00e9culas de inmunoglobinas producidas contra un ant\u00edgeno espec\u00edfico, pero cada una reconoce una regi\u00f3n distinta, tambi\u00e9n denominada determinante antig\u00e9nico o ep\u00edtopo. Actualmente, se encuentran disponibles en el mercado varios tipos de anticuerpos policlonales, producidos para test de diagn\u00f3stico o para combatir enfermedades infecciosas. Pero hay otro tipo de anticuerpos, denominados monoclonales, que se elaboran a partir de un \u00fanico linfocito B, que son capaces de reconocer y combatir tan s\u00f3lo una regi\u00f3n del ant\u00edgeno. Es decir, son m\u00e1s espec\u00edficos y, por eso mismo, representan un gran avance para el tratamiento de varias enfermedades, principalmente el c\u00e1ncer. El modo en que se los produce es distinto.<\/p>\n

\"Incubadora

EDUARDO CESAR<\/span>Incubadora donde se producen los anticuerposEDUARDO CESAR<\/span><\/p><\/div>\n

El paso inicial consiste en la inmunizaci\u00f3n de ratones con el ant\u00edgeno y, a continuaci\u00f3n, se les extrae el bazo, para obtener los linfocitos B o linfoblastos. Luego, esas c\u00e9lulas se mezclan con otras, cancer\u00edgenas, extra\u00eddas de un mieloma murino (de rat\u00f3n). \u201cAs\u00ed obtenemos un conglomerado de c\u00e9lulas h\u00edbridas denominado hibridoma\u201d, explica Peroni. \u201c\u00c9ste tiene una capacidad de crecimiento \u2018infinito\u2019 en cultivo, conferida por las c\u00e9lulas cancerosas, y tambi\u00e9n la de producir anticuerpos, obtenidos de los linfocitos B del bazo del rat\u00f3n. De esta manera, se pueden producir anticuerpos en laboratorio con una menor cantidad de animales\u201d.<\/p>\n

Seg\u00fan Peroni, la elecci\u00f3n entre producir anticuerpos poli o monoclonales depende de las t\u00e9cnicas y del objetivo final. \u201cAlgunos ant\u00edgenos son muy similares entre s\u00ed y, en esos casos, lo mejor es utilizar uno monoclonal, porque se puede realizar una selecci\u00f3n de clones m\u00e1s espec\u00edficos\u201d, dice. \u201cEn general, cuando el objetivo del uso de los anticuerpos busca homogeneidad y producci\u00f3n en mayor escala, resulta interesante el uso de monoclonales, ya que al disponer del hibridoma se pueden producir los anticuerpos en cultivo y purificarlos. Adem\u00e1s, esos anticuerpos siempre ser\u00e1n iguales a los originales, lo cual garantiza reproductibilidad y especificidad en el test\u201d.<\/p>\n

Con respecto al test para diagnosticar la roya asi\u00e1tica de la soja, la empresa puede emplear tanto los poli como los monoclonales. Para los que se han producido hasta ahora, empleando el m\u00e9todo Elisa, se utilizaron ambos tipos de anticuerpos. El m\u00e9todo Elisa es una t\u00e9cnica para an\u00e1lisis inmunol\u00f3gicos, capaz de detectar un ant\u00edgeno o anticuerpo en una muestra, bas\u00e1ndose en la interacci\u00f3n entre ellos. Si uno de ellos se encuentra presente, se produce una se\u00f1al visible \u2012tal como un cambio de color\u2012 que se detecta por medio de un espectrofot\u00f3metro. Pese a los buenos resultados que se obtuvieron con ese m\u00e9todo en el diagn\u00f3stico de la roya asi\u00e1tica de la soja, en los test de campo realizados por Rheabiotech se presentaron algunos problemas. \u201cSi bien es sencillo, esa clase de test requiere de una estructura m\u00ednima, constituida por una heladera, un lector de microplacas y un empleado capaz de interpretar los resultados, algo que normalmente no existe en la zona de las plantaciones\u201d, dice Peroni. Por eso estamos desarrollando un kit<\/i> diferente, que se vale de una membrana de nitrocelulosa, en forma de cinta, similar a un test de embarazo\u201d.<\/p>\n

\"freezer

EDUARDO CESAR<\/span>freezer para la conservaci\u00f3n del banco de c\u00e9lulas a -80\u00baCEDUARDO CESAR<\/span><\/p><\/div>\n

Para eso, se firm\u00f3 un convenio con ParteCurae Analysis, que interviene en los segmentos agr\u00edcola, ambiental, biotecnol\u00f3gico y veterinario, y elabora entre otros productos, kits<\/i> de diagn\u00f3stico r\u00e1pido para enfermedades de animales y plantas. En el caso del kit<\/i> que se utiliza para detectar la roya asi\u00e1tica de la soja, se compone de una cinta que contiene anticuerpos en dos sectores definidos. \u201cEn uno de ellos se depositan los anticuerpos contra el ant\u00edgeno en estudio (sector de test), en este caso, el micelio del hongo Phakopsora pachyrhizi<\/i>\u201d, explica la bi\u00f3loga molecular Regiane Travensolo Sacomano, investigadora de ParteCurae. \u201cEn el otro se colocan los anticuerpos contra los \u2018conjugados\u2019 (sector de control)\u201d. Ella explica que, en ese kit<\/i>, los conjugados son anticuerpos secundarios, espec\u00edficos contra los anticuerpos primarios, marcados con alguna enzima u otra sustancia que torne visible la reacci\u00f3n. En otras palabras, hay dos tipos de anticuerpos en el test. Los primarios, que reaccionan contra el ant\u00edgeno, en este caso, el hongo. Y los secundarios, que contienen el marcador y reaccionan contra los primarios, otorgando visibilidad a toda la reacci\u00f3n. En el caso del kit<\/i> desarrollado por ParteCurae, los marcadores que se utilizan son nanopart\u00edculas de oro.<\/p>\n

Durante el diagn\u00f3stico, el complejo ant\u00edgeno-anticuerpo conjugado migra por la membrana (la cinta) hasta llegar a las regiones de test y control. \u201cSi aparecen dos l\u00edneas rojas, significa que el resultado es positivo, es decir, la muestra de hojas se encuentra contaminada con el hongo\u201d, dice Travensolo. \u201cLos an\u00e1lisis con resultado negativo indican tan s\u00f3lo una l\u00ednea roja, la de control, que es una forma de demostrar que el test funcion\u00f3 en forma adecuada\u201d. El diagn\u00f3stico se realiza en 10 minutos.<\/p>\n

Graves da\u00f1os
\n<\/b>Por medio de un proceso similar, Rheabiotech est\u00e1 trabajando para desarrollar kits<\/i> para la detecci\u00f3n de dos tipos de virus que atacan a las papas, el virus X de la papa (PVX) y el virus Y de la papa (PVY), tambi\u00e9n denominados mosaico rugoso y mosaico severo de la papa, respectivamente. En esta ocasi\u00f3n, los anticuerpos policlonales contra los virus fueron desarrollados por el alumno de maestr\u00eda Marcel Salmeron Lorenzi, bajo la supervisi\u00f3n de la profesora Dagmar Ruth Stach-Machado, del Instituto de Biolog\u00eda de la Universidad de Campinas (Unicamp). La empresa adquiri\u00f3 la licencia de esa tecnolog\u00eda, y ahora intenta transformarla en un producto comercial. En Brasil, el cultivo de la papa ocupa un \u00e1rea de alrededor de 130 mil hect\u00e1reas, con una producci\u00f3n de unos 2 millones de toneladas por a\u00f1o. En los \u00faltimos a\u00f1os, sin embargo, ha sufrido graves da\u00f1os a causa de los virus PVX y PVY. \u201cCausaron problemas en las hojas y manchas en las papas\u201d, relata Peroni. Seg\u00fan Stach-Machado, se trata de un serio inconveniente. \u201cEn Brasil, las enfermedades provocadas por esos virus constituyen una de las principales limitaciones para el aumento de la producci\u00f3n\u201d, dice.<\/p>\n

\"\"Infograf\u00eda: Ana Paula Campos \/ Ilustraci\u00f3n: Alexandre Affonso<\/span><\/a>Para esos dos proyectos de producci\u00f3n del test para microorganismos espec\u00edficos y para un tercero, de desarrollo de anticuerpos secundarios y conjugados, Rheabiotech recibi\u00f3, entre 2004 \u2012cuando su nombre todav\u00eda era Imuny\u2012 y 2014, alrededor de 1.300.000 reales de la FAPESP, por medio del Programa de Investigaci\u00f3n Innovadora en Peque\u00f1as Empresas (Pipe). En 2008, Peroni se asoci\u00f3 con Alvarez Rojas, fundadora de Imuny, y surgi\u00f3 Rheabiotech, con el objetivo de establecer un puente entre las investigaciones realizadas en las universidades y el mercado.<\/p>\n

Proyectos<\/strong>
\n1.<\/strong> Desarrollo de kits<\/i> diagn\u00f3sticos para fitopat\u00f3genos de importancia para la agricultura (n\u00ba 2008\/53621-4<\/a>); Modalidad<\/b> Programa de Investigaci\u00f3n Innovadora en Peque\u00f1as Empresas (Pipe); Investigador responsable<\/b> Lu\u00eds Ant\u00f4nio Peroni (Rheabiotech); Inversi\u00f3n<\/b> R$ 386.992,10 (FAPESP).
\n2.<\/strong> Producci\u00f3n de anticuerpos para m\u00e9todos inmunoqu\u00edmicos \u2013 inserci\u00f3n en el mercado (n\u00ba 2012\/51000-8<\/a> e n\u00ba 2013\/50045-0); Modalidad<\/b> Programa de Investigaci\u00f3n Innovadora en Peque\u00f1as Empresas (Pipe); Investigadora responsable<\/b> Fernanda Alvarez Rojas (Rheabiotech); Inversi\u00f3n<\/b> R$ 256.094,26 (FAPESP) y R$ 252.000,00 (Finep).<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"El diagn\u00f3stico r\u00e1pido evita la propagaci\u00f3n de enfermedades por los cultivos","protected":false},"author":20,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"_exactmetrics_skip_tracking":false,"_exactmetrics_sitenote_active":false,"_exactmetrics_sitenote_note":"","_exactmetrics_sitenote_category":0,"footnotes":""},"categories":[1561,192],"tags":[267,281],"coauthors":[112],"class_list":["post-156768","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-programa-de-innovacion-tecnologica-en-pequenas-empresas-pipe","category-tecnologia-es","tag-agronomia-es","tag-biotecnologia-es"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/156768","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/users\/20"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=156768"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/156768\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=156768"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=156768"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=156768"},{"taxonomy":"author","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/coauthors?post=156768"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}