{"id":332459,"date":"2020-02-14T14:51:04","date_gmt":"2020-02-14T17:51:04","guid":{"rendered":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/?p=332459"},"modified":"2020-02-20T18:48:06","modified_gmt":"2020-02-20T21:48:06","slug":"el-reto-de-diagnosticar-el-zika","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/el-reto-de-diagnosticar-el-zika\/","title":{"rendered":"El reto de diagnosticar el zika"},"content":{"rendered":"

En 2015 apareci\u00f3 en Brasil una enfermedad hasta entonces en las sombras: el zika, cuyo origen y consecuencias, en particular la microcefalia, inmediatamente salieron a la luz. Oficialmente, la cifra de casos registrados de esta afecci\u00f3n ha ca\u00eddo bastante durante los \u00faltimos cuatro a\u00f1os, de 216 mil en 2016 a 2.300 entre enero y marzo de este a\u00f1o. Sin embargo, el alcance real de la epidemia es desconocido, puesto que los test m\u00e1s utilizados \u2013los r\u00e1pidos y los serol\u00f3gicos\u2013 no siempre identifican correctamente al agente causal de la enfermedad. Esta dificultad radica en la gran semejanza gen\u00e9tica existente entre el virus del Zika y el del dengue, lo que dificulta la labor de distinguir entre uno y otro. Se trata de lo que se denomina reacci\u00f3n cruzada, una limitaci\u00f3n de las herramientas de diagn\u00f3stico que se conoce desde hace al menos 20 a\u00f1os. Para complicar las cosas todav\u00eda m\u00e1s, algunos s\u00edntomas cl\u00ednicos de las dos dolencias son similares, tales como fiebre y dolores musculares, y ambos virus son transmitidos por la misma especie de mosquito, el Aedes aegypti<\/em>. La diferenciaci\u00f3n del virus del Zika es importante para realizar el diagn\u00f3stico en laboratorio de la enfermedad, conocer su ritmo de propagaci\u00f3n en la poblaci\u00f3n y establecer medidas de prevenci\u00f3n.<\/p>\n

Desde 2016, la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria (Anvisa) de Brasil, con base en informaci\u00f3n de los propios fabricantes, aprob\u00f3 para su venta 48 tipos de test de identificaci\u00f3n del virus del Zika. Su comercializaci\u00f3n est\u00e1 a cargo de nueve empresas nacionales (privadas o p\u00fablicas) y 16 importadoras. Anvisa sell\u00f3 y autoriz\u00f3 5 test r\u00e1pidos, 36 serol\u00f3gicos y 7 moleculares. Los an\u00e1lisis r\u00e1pidos dependen de la cantidad de anticuerpos producidos contra el virus, bastante baja en los primeros d\u00edas posteriores a la infecci\u00f3n. Del mismo modo, los test serol\u00f3gicos detectan anticuerpos cuya producci\u00f3n fue estimulada por la presencia del virus en el organismo, principalmente las inmunoglobulinas del tipo G (IgG) y M (IgM), que pueden detectarse entre el quinto y el s\u00e9ptimo d\u00eda posteriores a la aparici\u00f3n de los s\u00edntomas. Los anticuerpos, producidos por las c\u00e9lulas de defensa, permanecen en la sangre, aunque no siempre resulta posible identificar cu\u00e1l pat\u00f3geno activ\u00f3 su producci\u00f3n. Este tipo de an\u00e1lisis puede realizarse a partir de una semana despu\u00e9s del contagio y tiene un costo menor que el molecular.<\/p>\n

Los test moleculares, cuya denominaci\u00f3n es RT-PCR, las siglas de reacci\u00f3n de transcriptasa reversa, seguida de otra, en cadena de polimerasa, registran tramos espec\u00edficos de cada virus. Son los m\u00e1s precisos de todos, pero deben efectuarse, a lo sumo, una semana despu\u00e9s de la infecci\u00f3n, cuando el virus a\u00fan puede detectarse en la sangre. Y deben estar a cargo de equipos especializados. En los laboratorios privados, el precio de los test para el diagn\u00f3stico del Zika var\u00eda de 10 a 600 reales, dependiendo de la metodolog\u00eda empleada.<\/p>\n

Seg\u00fan dan cuenta los fabricantes, los test diferencian los anticuerpos producidos por el organismo como respuesta al virus del Zika de los resultantes de la infecci\u00f3n por dengue. Pero existen indicios de que esos resultados no siempre son confiables. \u201cLos test serol\u00f3gicos disponibles no parecen ser satisfactorios para diferenciar las infecciones causadas por el virus del Zika y el del dengue\u201d, dice el infect\u00f3logo Gilherme de Sousa Ribeiro, de la Facultad de Medicina de la Universidad Federal de Bah\u00eda (UFBA) y de la Fundaci\u00f3n Oswaldo Cruz (Fiocruz), en Salvador (BA). Los fabricantes deber\u00edan proveer informaci\u00f3n m\u00e1s minuciosa al respecto de los test y las muestras que utilizaron para validarlos\u201d.<\/p>\n

Los CDC de Estados Unidos advierten que los test para zika pueden dar resultados negativos para la enfermedad real, o positivos para una inexistente<\/p><\/blockquote>\n

De Sousa Ribeiro coordin\u00f3 una evaluaci\u00f3n de dos test de diagn\u00f3stico de zika de uno de los fabricantes principales, Euroinmun, filial de una multinacional alemana. En ese trabajo, que sali\u00f3 publicado en julio de 2018 en la revista cient\u00edfica Virology Journal<\/em>, el test para la detecci\u00f3n de anticuerpos IgM contra el virus del Zika no logr\u00f3 detectar al 87,5% de las personas infectadas y registr\u00f3 solamente un 2% de falsos positivos, que marcaban una infecci\u00f3n por el virus que en realidad no exist\u00eda.<\/p>\n

En cambio, el an\u00e1lisis del test para la detecci\u00f3n de anticuerpos IgG registr\u00f3 una sensibilidad (la capacidad de identificar correctamente a los individuos con una enfermedad) del 100% y una especificidad (la capacidad de registrar un resultado negativo en quienes no padecen una enfermedad) del 27,3% en muestras de suero de pacientes con dengue y del 45% en muestras de donantes de sangre. Con base en el resultado de este \u00faltimo test, todas las muestras de los pacientes con la enfermedad fueron positivas, pero para muchas de las que no padec\u00edan la enfermedad, el test present\u00f3 resultados falsos positivos, indicando, err\u00f3neamente, que la hab\u00edan contra\u00eddo.<\/p>\n

Desde Euroinmun impugnaron la metodolog\u00eda y los resultados de la evaluaci\u00f3n. El farmac\u00e9utico y bioqu\u00edmico Gustavo Janaudis, director ejecutivo de la empresa, dice que el test puede identificar a todas las personas que tienen el virus en la sangre y registra solamente un 2% de falsos positivos. \u201cLa reactividad cruzada con dengue es pr\u00e1cticamente nula\u201d, afirma. La empresa Mobius Life Science, una compa\u00f1\u00eda brasile\u00f1a con sede en la localidad de Pinhais, estado de Paran\u00e1, produce test con tecnolog\u00eda propia a partir del ant\u00edgeno de la prote\u00edna NS-1 del virus del Zika. Sus test, que no fueron sometidos a una evaluaci\u00f3n independiente, tambi\u00e9n podr\u00edan ser capaces de identificar al 100% de las personas con el virus del Zika y dar\u00edan tan solo un 2% de falsos positivos, seg\u00fan Aline Leck, integrante del consejo cient\u00edfico de la empresa. Esa prote\u00edna es una de las primeras que produce el organismo cuando ocurre la infecci\u00f3n por el virus del Zika.<\/p>\n

\u201cNo podemos confiar en la informaci\u00f3n de los fabricantes\u201d, dice el infect\u00f3logo Celso Granato, docente en la Universidad Federal de S\u00e3o Paulo (Unifesp) y asesor m\u00e9dico del grupo Fleury, integrado por una red de 185 laboratorios de diagn\u00f3sticos presente en ocho estados Brasil. \u201cLos test pueden funcionar en poblaciones del exterior, pero no aqu\u00ed. Las cepas del virus que se hallaron en la poblaci\u00f3n brasile\u00f1a son distintas a las de los pa\u00edses en los que se elaboraron los test\u201d. Seg\u00fan \u00e9l, los equipos de Fleury efectuaron una validaci\u00f3n interna de los test de los fabricantes antes de utilizarlos, con base en muestras de pacientes con diagn\u00f3stico de zika confirmado en 2016, y detectaron diferencias de hasta 30 puntos porcentuales menos que los valores informados por los fabricantes.<\/p>\n

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Frederick Murphy\/CDC y Cynthia Goldsmith\/CDC<\/span><\/a> Los c\u00edrculos obscuros en estas im\u00e1genes de microscop\u00eda representan los virus del dengue (izq<\/em>.) y del Zika (der<\/em>.). Las prote\u00ednas de superficie de los dos tipos presentan una similitud gen\u00e9tica del 41% al 46%Frederick Murphy\/CDC y Cynthia Goldsmith\/CDC<\/span><\/p><\/div>\n

Un nuevo test<\/strong>
\nEl Instituto de Ciencias Biom\u00e9dicas de la Universidad de S\u00e3o Paulo (ICB-USP) cre\u00f3 un test serol\u00f3gico para el diagn\u00f3stico de zika en colaboraci\u00f3n con AdvaGen, una peque\u00f1a empresa con una decena de empleados y con sede en la localidad de Itu, en el interior paulista. La compa\u00f1\u00eda, fundada por dos empresarios y sin participaci\u00f3n de investigadores, fabricaba placas de Petri cuando ocurri\u00f3 la epidemia de zika en el pa\u00eds y, entonces, sus due\u00f1os se aliaron con el ICB con la intenci\u00f3n de idear un an\u00e1lisis para su detecci\u00f3n. Incluso antes de adoptar su nombre actual, la empresa recibi\u00f3 ayuda de la FAPESP en el marco del Programa de Investigaci\u00f3n Innovadora en Peque\u00f1as Empresas (Pipe).<\/p>\n

El test de la USP, desarrollado a partir de 2015 con el prop\u00f3sito de evitar una reacci\u00f3n cruzada con el virus del dengue, est\u00e1 siendo evaluado en hospitales, centros de investigaci\u00f3n y laboratorios cl\u00ednicos de S\u00e3o Paulo y de otros estados. Seg\u00fan la biom\u00e9dica Danielle Oliveira, investigadora del ICB y coordinadora del proyecto, el test tendr\u00eda una precisi\u00f3n del 92% para registrar el virus del Zika en pacientes infectados y su porcentaje m\u00e1ximo de falsos positivos rondar\u00eda EL 5%.<\/p>\n

El examen del ICB presentar\u00eda un bajo riesgo de reacci\u00f3n cruzada debido a que utiliza un fragmento espec\u00edfico de la prote\u00edna NS-1 del virus del Zika. Otros fabricantes tambi\u00e9n informan que utilizan partes de esa prote\u00edna o su totalidad en sus test para detectar infecciones por zika. \u201cLa NS-1 es una de las primeras prote\u00ednas que libera el virus del Zika en el torrente sangu\u00edneo e induce una producci\u00f3n intensiva de anticuerpos\u201d, explica el bi\u00f3logo Luis Carlos de Souza Ferreira, director del ICB, quien particip\u00f3 en el trabajo. Seg\u00fan Wagner Rodrigues, director administrativo de AdvaGen, la meta consiste en producir la prote\u00edna en un volumen mucho mayor y lo m\u00e1s r\u00e1pidamente posible para participar en grandes licitaciones de compra promovidas por el Ministerio de Salud.<\/p>\n

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L\u00e9o Ramos Chaves<\/span><\/a> El test del ICB-USP tiene como objetivo ofrecer una precisi\u00f3n mayor porque utiliza un fragmento espec\u00edfico de una prote\u00edna del virus del ZikaL\u00e9o Ramos Chaves<\/span><\/p><\/div>\n

En febrero de este a\u00f1o, con base en laudos del Instituto Nacional de Control de Calidad en la Salud (INCQS, por sus siglas en portugu\u00e9s), ligado a la Fiocruz, la Anvisa prohibi\u00f3 la producci\u00f3n de test r\u00e1pidos para zika, dengue y chikungu\u00f1a de la Fundaci\u00f3n Bahiana de Investigaci\u00f3n Cient\u00edfica y Desarrollo Tecnol\u00f3gico, Suministro y Distribuci\u00f3n de Medicamentos \u2013 Bahiafarma, de la gobernaci\u00f3n estadual. Los dict\u00e1menes argumentaron que esos an\u00e1lisis no brindaban resultados confiables. De acuerdo con su asesor\u00eda de comunicaci\u00f3n, Bahiafarma recus\u00f3 judicialmente las acusaciones de que la eficacia de las pruebas era baja. Tambi\u00e9n manifest\u00f3 que ya hab\u00eda cesado su producci\u00f3n previamente al fallo de Anvisa, una vez finalizado el contrato con el Ministerio de Salud, para el cual aport\u00f3 alrededor de 6,5 millones de test diagn\u00f3sticos para zika, dengue y chikungu\u00f1a desde 2016, a un costo aproximado de 165 millones de reales. El test de diagn\u00f3stico de zika de Bahiafarma, un desarrollo conjunto con la empresa coreana Genbody y uno de los primeros del pa\u00eds, seg\u00fan la empresa, logr\u00f3 detectar correctamente al 94% de las personas infectadas con el virus del Zika y registr\u00f3 un 7% de falsos positivos.<\/p>\n

Las instituciones p\u00fablicas se disputan con las empresas privadas los encargos del Ministerio de Salud, de los centros de investigaci\u00f3n y de los laboratorios cl\u00ednicos privados. El Instituto de Tecnolog\u00eda en Inmunobiol\u00f3gicos (Bio-Manguinhos), de la Fiocruz, produce pruebas para la detecci\u00f3n de IgG e IgM con tecnolog\u00eda de la empresa estadounidense Chembio. Esos test, elaborados con fragmentos de prote\u00ednas virales, entre ellas la NS-1, ofrecen sensibilidad y especificidad superiores al 95%, seg\u00fan Antonio Gomes Pinto, gerente del programa de desarrollo tecnol\u00f3gico de reactivos para diagn\u00f3stico de Bio-Manguinhos\/ Fiocruz. \u201cCon todo, en muestras de pacientes con dengue, detectamos reacciones cruzadas, en niveles superiores al 50% con la respuesta de IgG de nuestros test de zika\u201d, dice. \u201cEn todos los test de diagn\u00f3stico comerciales disponibles en la actualidad, en Brasil y en el resto del mundo, se detectan altos porcentajes de reacciones cruzadas, especialmente para la respuesta de IgG\u201d.<\/p>\n

Si bien entre un 41% y un 46% de la secuencia prote\u00ednica de la superficie de los virus del Zika y del dengue son diferentes, sus similitudes son suficientes como para permitir reacciones cruzadas: la mayor\u00eda de los anticuerpos que reaccionan a las prote\u00ednas de la superficie de los virus del dengue tambi\u00e9n reaccionan con las del Zika, seg\u00fan evidencia un estudio efectuado por cient\u00edficos del Imperial College, de Londres, que sali\u00f3 publicado en la revista Nature Immunology<\/em> en 2016. Los Centros de Control y Prevenci\u00f3n de Enfermedades (CDC, por sus siglas en ingl\u00e9s), de Estados Unidos, alertan que no existe un test 100% preciso para el virus del Zika. A veces el resultado puede dar negativo en un caso de infecci\u00f3n real o indicar un resultado positivo para una dolencia inexistente.<\/p>\n

Proyecto<\/strong>
\nDiagn\u00f3stico serol\u00f3gico r\u00e1pido y de bajo costo para el virus del Zika, utilizando la plataforma Elisa-IgG\/ IgM (n\u00ba 16\/08727-5<\/a>); Modalidad<\/strong> Investigaci\u00f3n Innovadora en Peque\u00f1as Empresas (Pipe); Investigadora responsable<\/strong> Danielle Bruna Leal de Oliveira (Medios de Cultivo Barth); Inversi\u00f3n <\/strong>R$ 1.491.845,40<\/p>\n

Art\u00edculos cient\u00edficos<\/strong>
\nKIKUTI, M. et al<\/em>. Diagnostic performance of commercial IgM and IgG enzyme-linked immunoassays (Elisas) for diagnosis of zika virus infection<\/a>. Virology Journal<\/strong>. v. 15, n. 1, p. 2-7. 13 jul. 2018.
\nDEJNIRATTISAI, W. et al<\/em>. Dengue virus sero-cross-reactivity drives antibody-dependent enhancement of infection with zika virus<\/a>. Nature Immunology<\/strong>. v. 17, n. 9, p. 1102-8. sept. 2016.
\nMONTECILLO-AGUADO, M. R. et al<\/em>. Cross-reaction, enhancement, and neutralization activity of dengue virus antibodies against zika virus: A study in the Mexican population<\/a>. Journal of Immunology Research<\/strong>. v. 2019, ID 7239347, p. 1-14. 2 sept. 2019.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"No existe consenso cient\u00edfico en que alguno de los 48 test de laboratorio que han sido aprobados logre diferenciar las infecciones de aquellas que causa el virus del dengue","protected":false},"author":17,"featured_media":332460,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"_exactmetrics_skip_tracking":false,"_exactmetrics_sitenote_active":false,"_exactmetrics_sitenote_note":"","_exactmetrics_sitenote_category":0,"footnotes":""},"categories":[181,1561],"tags":[311,329],"coauthors":[5968],"class_list":["post-332459","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-ciencia-es","category-programa-de-innovacion-tecnologica-en-pequenas-empresas-pipe","tag-inmunologia","tag-salud-publica"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/332459","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/users\/17"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=332459"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/332459\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":332480,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/332459\/revisions\/332480"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/media\/332460"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=332459"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=332459"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=332459"},{"taxonomy":"author","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/coauthors?post=332459"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}