La producci\u00f3n de vacas y cabras que portan en la leche la prote\u00edna humana responsable de la coagulaci\u00f3n de la sangre, llamada factor IX, representa un gran avance para los portadores de hemofilia. Al aisl\u00e1rsela de la leche, dicha prote\u00edna podr\u00e1 transformarse en un producto m\u00e1s barato y estar\u00e1 m\u00e1s f\u00e1cilmente a disposici\u00f3n de los enfermos, que en la actualidad controlan la enfermedad con medicamentos derivados de la sangre de donadores sanos. La hemofilia es una enfermedad gen\u00e9tica que se caracteriza por problemas en la coagulaci\u00f3n de la sangre. Sin el factor IX, los pacientes pueden tener hemorragias ante cualquier corte en la piel, por ejemplo. Los estudios para esta nueva posibilidad de tratamiento de la hemofilia se iniciaron tras sellarse un convenio entre investigadores de la Universidad Federal de S\u00e3o Paulo (Unifesp) y la estatal Empresa Brasile\u00f1a de Investigaci\u00f3n Agropecuaria (Emrapa, sigla en portugu\u00e9s). Mediante el empleo de recursos de la biolog\u00eda molecular, los cient\u00edficos de ambas instituciones est\u00e1n trabajando para desarrollar vacas y cabras gen\u00e9ticamente modificadas, capaces de producir el factor XI en la leche.<\/p>\n
El primero paso rumbo a la creaci\u00f3n de estas biof\u00e1bricas implic\u00f3 el desarrollo de un linaje de lauchas transg\u00e9nicas en la Unifesp. Los animales poseen en su c\u00f3digo gen\u00e9tico el gen codificador de esa prote\u00edna humana. Se est\u00e1n evaluando muestras de la leche de los roedores transg\u00e9nicos que contienen la prote\u00edna de la coagulaci\u00f3n. Estos estudios est\u00e1n a cargo de un equipo del Hospital de Apoyo de Brasilia. Estamos sac\u00e1ndoles sangre a pacientes portadores de hemofilia para evaluar in vitro su efecto de coagulaci\u00f3n y compararlo con los productos comercializados actualmente, afirma el investigador El\u00edbio Rech, coordinador del proyecto en Embrapa Recursos Gen\u00e9ticos y Biotecnolog\u00eda. Luego vamos a iniciar la producci\u00f3n de un animal vacuno transg\u00e9nico. Debido a que ya dominamos esta tecnolog\u00eda, esperamos lograr crear un animal con el gen humano del factor IX antes de 2007, dice el cient\u00edfico.<\/p>\n
La creaci\u00f3n de ratones gen\u00e9ticamente modificados, el puntapi\u00e9 inicial de la investigaci\u00f3n, se concret\u00f3 hace alrededor de un a\u00f1o. Los trabajos estuvieron bajo la coordinaci\u00f3n del qu\u00edmico Jo\u00e3o Bosco Pesquero, vicedirector del Centro de Desarrollo de Modelos Experimentales en Medicina y Biolog\u00eda (Cedeme) de la Unifesp, y contaron con la participaci\u00f3n del profesor Luiz Eug\u00eanio Ara\u00fajo de Moraes Mello, director general del centro, la bi\u00f3loga Heloisa Allegro Baptista, responsable del laboratorio de animales transg\u00e9nicos, y la biom\u00e9dica Fabiana Louise Teixeira Motta. Am\u00e9n de la semejanza con el funcionamiento del organismo humano, los ratones aportan una serie de ventajas por sobre otros animales. El costo de mantenimiento de una laucha es decenas de veces menor que el de las cabras y las vacas, y el tiempo de gestaci\u00f3n y desarrollo de los animalitos es mucho m\u00e1s corto, lo que nos permite saber si la experiencia fue o no exitosa. Al cabo de tres meses, la cr\u00eda ya ha nacido, se ha destetado y est\u00e1 lista para procrear, dice Pesquero. La constataci\u00f3n de si las cr\u00edas son o no transg\u00e9nicas se efect\u00faa un mes despu\u00e9s del nacimiento. Se someten a an\u00e1lisis de ADN peque\u00f1os trozos de la oreja o de la cola de los animales, para evaluar si los genes ex\u00f3genos est\u00e1n o no presentes en sus genomas.<\/p>\n
El Cedeme, creado en 1996, en reemplazo del Bioterio Central, es el \u00fanico laboratorio brasile\u00f1o de este tipo, y uno de los dos que existen en Sudam\u00e9rica el otro se encuentra en la Universidad de Buenos Aires, Argentina, y tiene capacidad para producir localmente modelos de animales transg\u00e9nicos para otros investigadores. Estos ratones producidos a partir del retiro de un gen cualquiera (modelo nocaut) o por medio del agregado de un gen ex\u00f3geno (modelo de adici\u00f3n g\u00e9nica) tiene diversas aplicaciones cient\u00edficas y biotecnol\u00f3gicas. En el \u00e1rea m\u00e9dica, creamos modelos animales para estudiar enfermedades humanas como la hemofilia, la hipertensi\u00f3n, la diabetes, el mal de Alzheimer y el c\u00e1ncer, y desarrollar drogas y terapias para combatirlas, comenta Pesquero. Las restricciones \u00e9ticas y de costo son mucho menores para la realizaci\u00f3n de experimentos en estos animales.<\/p>\n
Los ratones gen\u00e9ticamente modificados de la Unifesp tienen menos de 10 cent\u00edmetros de longitud y son ideales tambi\u00e9n para estudiar la funci\u00f3n de los genes humanos. Con el reciente secuenciamiento del genoma humano, pudimos verificar que no conocemos la funci\u00f3n de la mayor\u00eda de los genes presentes en nuestro genoma. De esta manera, los animales transg\u00e9nicos constituyen herramientas importantes con miras a obtener informaciones sobre la funci\u00f3n de estos genes.<\/p>\n
Asimismo, la tendencia actual de la industria farmac\u00e9utica mundial apunta a la humanizaci\u00f3n de los ratones, para la utilizaci\u00f3n de estos modelos en el desarrollo de nuevas drogas contra diversas enfermedades. Mediante dicho proceso, se extrae un gen del genoma del roedor, empleando la t\u00e9cnica de nocaut, y se inserta un gen humano mediante el proceso de adici\u00f3n g\u00e9nica. Este proceso facilitar\u00e1 sobremanera el desarrollo de nuevos medicamentos, abaratando los costos y disminuyendo el tiempo para que la nueva droga llegue a las farmacias. Otra gran ventaja de nuestro trabajo para el pa\u00eds es la independencia tecnol\u00f3gica. A largo plazo, tambi\u00e9n redundar\u00e1 en un ahorro para los investigadores que necesitan importar modelos animales, a valores alt\u00edsimos. Nuestros ratones cuestan alrededor de 5 mil d\u00f3lares la yunta, mientras que, de import\u00e1rselos, el precio se eleva diez veces, dice Pesquero. Para \u00e9ste, hay un buen mercado para estos animales en Brasil. Existen entre 50 y 100 grupos de cient\u00edficos brasile\u00f1os que est\u00e1n haciendo investigaciones con animales transg\u00e9nicos, y muchos no saben que tenemos ese know-how. Adem\u00e1s, nuestros modelos podr\u00e1n vend\u00e9rseles a cient\u00edficos de otros pa\u00edses.<\/p>\n
El primer transg\u00e9nico creado por el grupo fue el rat\u00f3n V\u00edtor, nacido el d\u00eda 24 de diciembre de 2001 (lea en Pesquisa FAPESP n\u00ba 75). El roedor fue producido con la duplicaci\u00f3n del receptor B2 de las cininas, una sustancia asociada a los procesos inflamatorios e hipertensivos. Aunque no fue el primer ratoncito gen\u00e9ticamente modificado desarrollado en Brasil, el laboratorio de la Unifesp es el \u00fanico del pa\u00eds que est\u00e1 actualmente estructurado como para producir animales transg\u00e9nicos mediante el empleo de la t\u00e9cnica de microinyecci\u00f3n pronuclear, la m\u00e1s usada por los cient\u00edficos en todo el mundo. la gran ventaja de este m\u00e9todo con relaci\u00f3n a los otros es la eficiencia en la producci\u00f3n. El \u00edndice de animales positivos, es decir, que contienen o gen insertado en su genoma, es muy superior al de otros m\u00e9todos, dice Pesquero. Mediante la aplicaci\u00f3n de esta t\u00e9cnica, se recoge el \u00f3vulo fecundado momentos despu\u00e9s del apareamiento. Antes de que los n\u00facleos celulares del espermatozoide y del \u00f3vulo \u2212los llamados pron\u00facleos\u2212 se fundan, se inyecta en uno de ellos una soluci\u00f3n con copias del ADN ex\u00f3geno, que pueden ser de individuos de la misma especie o de otras (genes humanos, por ejemplo). El siguiente paso consiste en transferir el embri\u00f3n al \u00fatero de una hembra procreadora hospedera, la llamada madre de alquiler, donde se gestar\u00e1 la cr\u00eda.<\/p>\n
Otra ventaja de esta t\u00e9cnica es que permite obtener animales que expresen el gen ex\u00f3geno en todas sus c\u00e9lulas, incluso en las germinativas (el \u00f3vulo y el espermatozoide), asegurando as\u00ed la prole transg\u00e9nica. Aunque es m\u00e1s eficaz, la t\u00e9cnica de microinyecci\u00f3n pronuclear es tambi\u00e9n m\u00e1s cara, y requiere de instrumental especial, como por ejemplo microscopios de luz invertida y micromanipuladores, am\u00e9n de personal altamente calificado, explica Pesquero.<\/p>\n
Luego del nacimiento de V\u00edtor, el equipo de la Unifesp logr\u00f3 producir con \u00e9xito otros dos roedores con alteraciones gen\u00e9ticas, adem\u00e1s de aqu\u00e9l con el gen de la prote\u00edna del factor IX. Uno de estos animales, una laucha (Mus musculus), recibi\u00f3 el agregado de un gen de otra especie de rat\u00f3n (Rattus norvegicus), productor de la enzima tonina que, seg\u00fan se cree, est\u00e1 relacionada con los procesos hipertensivos. Este animal fue generado para el investigador Jorge Luiz Pesquero, hermano de Jo\u00e3o Bosco y profesor de la Universidad Federal de Minas Gerais (UFMG) y de la Universidad Mogi de las Cruzes (UMC). ?En experiencias in vitro, la tonina participa en el proceso de liberaci\u00f3n de la angiotensina II, una sustancia que produce vasoconstricci\u00f3n (reducci\u00f3n del calibre de los vasos sangu\u00edneos). Para saber con seguridad si la misma est\u00e1 realmente involucrada en la g\u00e9nesis y en el mantenimiento de la hipertensi\u00f3n arterial, una alternativa es estudiar animales transg\u00e9nicos que tengan esa enzima producida a una escala amplificada, afirma el cient\u00edfico.<\/p>\n
Hipertensi\u00f3n y memoria Desde la creaci\u00f3n del primer rat\u00f3n transg\u00e9nico, hace cuatro a\u00f1os, los cient\u00edficos del Cedeme lograron perfeccionar su m\u00e9todo de trabajo. Prueba de ello es que, para la creaci\u00f3n del primero, se hizo necesario inocular 500 embriones. En la actualidad, el \u00edndice de acierto es mucho mayor, del orden del 1%. De este modo, por cada animal producido se inoculan cien embriones en promedio. El dominio de la t\u00e9cnica tambi\u00e9n ha agilizado la producci\u00f3n de modelos animales. Al margen de la producci\u00f3n de estos roedores, el Cedeme tambi\u00e9n trabaja con criopreservaci\u00f3n, una t\u00e9cnica que consiste en almacenar espermatozoides o embriones de los transg\u00e9nicos para preservar sus linajes (o sus descendientes). Es un \u00e1rea importante, puesto que es mucho m\u00e1s barato mantener ese banco de germoplasma que conservar animales vivos en cautiverio.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"Roedores transg","protected":false},"author":23,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"_exactmetrics_skip_tracking":false,"_exactmetrics_sitenote_active":false,"_exactmetrics_sitenote_note":"","_exactmetrics_sitenote_category":0,"footnotes":""},"categories":[192],"tags":[],"coauthors":[116],"class_list":["post-80417","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-tecnologia-es"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/80417","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/users\/23"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=80417"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/80417\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=80417"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=80417"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=80417"},{"taxonomy":"author","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/coauthors?post=80417"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}
\n<\/strong>Al cabo de dos a\u00f1os de trabajo, obtuvimos informaciones muy interesantes. Nuestros datos apuntan hacia una direcci\u00f3n algo diferente de la que esper\u00e1bamos. Los animales que contienen los genes ex\u00f3genos de tonina son ligeramente hipertensos, pero no debido a la liberaci\u00f3n de angiotensina II. Ahora nuestro desaf\u00edo es descubrir qu\u00e9 sustancias est\u00e1n implicadas en este proceso hipertensivo, afirma Jorge Pesquero. Los resultados de la investigaci\u00f3n son importantes, pues podr\u00e1n servir de ayuda en el tratamiento de millones de portadores de hipertensi\u00f3n existentes en el planeta. El otro rat\u00f3n transg\u00e9nico nacido en la Unifesp recibi\u00f3 una secuencia de ADN para producir una gran cantidad de una prote\u00edna que puede estar implicada en la regulaci\u00f3n de aspectos del comportamiento alimentario y de la memoria. Este estudio es llevado adelante por la investigadora Beatriz Castilho, de la misma instituci\u00f3n. Nuestras investigaciones est\u00e1n reci\u00e9n empezando. Recibimos el primer animal transg\u00e9nico del Cedeme hace cuatro meses, dice la investigadora.<\/p>\n