{"id":90562,"date":"2011-11-01T12:20:00","date_gmt":"2011-11-01T14:20:00","guid":{"rendered":"http:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/2011\/11\/01\/reactivos-y-saludables\/"},"modified":"2015-12-29T13:11:25","modified_gmt":"2015-12-29T15:11:25","slug":"reactivos-y-saludables","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/reactivos-y-saludables\/","title":{"rendered":"Reactivos y saludables"},"content":{"rendered":"
\"Representaci\u00f3n

EDUARDO CESAR<\/span>Representaci\u00f3n de la mol\u00e9cula del ADN: la materia prima para la fabricaci\u00f3n de reactivos y prote\u00ednas recombinantesEDUARDO CESAR<\/span><\/p><\/div>\n

Si las pr\u00f3ximas etapas del estudio conducido por la bi\u00f3loga molecular Dulce Elena Casarini ocurrieran tal como est\u00e1n programadas, se pondr\u00e1 en venta el pr\u00f3ximo a\u00f1o el primer kit<\/em> para el diagn\u00f3stico preventivo de la hipertensi\u00f3n realizado a partir de un an\u00e1lisis de orina. La concreci\u00f3n del m\u00e9todo, no invasivo, constituye el corolario de un trabajo que comenz\u00f3 hace m\u00e1s de 10 a\u00f1os, cuando Casarini, profesora del grupo de Nefrolog\u00eda\u00a0 de la Universidad Federal de S\u00e3o Paulo (Unifesp), identific\u00f3 una nueva forma de la enzima conversora de angiotensina I (ECA) que funciona como marcador biol\u00f3gico de la presi\u00f3n alta. Sus estudios revelaron que los animales hipertensos, o con predisposici\u00f3n para desarrollar hipertensi\u00f3n, secretan en la orina la ECA con peso molecular de 90 kDa (kilod\u00e1ltons, la unidad de masa at\u00f3mica). El kit<\/em> est\u00e1 siendo desarrollado conjuntamente con Proteobras, una empresa de biotecnolog\u00eda con sede en Paul\u00ednia, en el interior de S\u00e3o Paulo, dirigida por el ingeniero Paulo Roberto Pesquero y por los hermanos bi\u00f3logos moleculares, en el consejo cient\u00edfico, profesores Jo\u00e3o Bosco Pesquero, de la Unifesp, y Jorge Luiz Pesquero, de la Universidad Federal de Minas Gerais (UFMG).<\/p>\n

La empresa obtuvo el a\u00f1o pasado una financiaci\u00f3n por valor 280 mil reales en el marco de un proyecto del Programa Investigaci\u00f3n Innovadora en Peque\u00f1as Empresas (Pipe) de la FAPESP, para desarrollar tres prote\u00ednas recombinantes \u2013 producidas a partir de genes clonados \u2013 y sus respectivos anticuerpos para utilizar en el kit<\/em>. La expectativa de Pesquero apunta a que el kit<\/em> pueda contribuir para su utilizaci\u00f3n en programas de pol\u00edticas p\u00fablicas. \u201cUna persona que posea el marcador de hipertensi\u00f3n podr\u00e1 recibir orientaciones tendientes a mejorar su calidad de vida, adoptando una alimentaci\u00f3n adecuada, realizando ejercicios y absteni\u00e9ndose de fumar y beber\u201d, afirma Dulce. Seg\u00fan ella, un grupo de 1.150 voluntarios con y sin historial de hipertensi\u00f3n en sus familias forman parte de la primera etapa de la investigaci\u00f3n, y los resultados obtenidos en 2001 (lea en <\/em>Pesquisa FAPESP, edici\u00f3n n\u00ba 69<\/em><\/a>) mostraron la eficiencia del kit<\/em> al revelar el riesgo en personas con historial familiar de la enfermedad y que presentaban una ECA con peso molecular 90 kDa en la orina. \u201cEstamos concluyendo la segunda fase de este estudio en el cual los mismos pacientes son evaluados para saber cu\u00e1les son los que presentaban el marcador molecular y se tornaron hipertensos\u201d.<\/p>\n

El kit <\/em>estar\u00e1 compuesto por una prote\u00edna y su respectivo anticuerpo, capaz de reconocer la presencia del marcador biol\u00f3gico de la hipertensi\u00f3n, y podr\u00e1 utilizarse para el diagn\u00f3stico preventivo de las lesiones renales, principalmente aqu\u00e9llas que ocurren en los t\u00famulos renales, unas estructuras microsc\u00f3picas que integran el sistema de filtrado de los ri\u00f1ones. Ese diagn\u00f3stico, seg\u00fan Dulce, resulta \u201cimportant\u00edsimo\u201d para el paciente diab\u00e9tico, y ayudar\u00e1 a los m\u00e9dicos en el tratamiento precoz del ri\u00f1\u00f3n, para que el individuo no desarrolle la denominada neuropat\u00eda diab\u00e9tica, que puede conducir a la insuficiencia renal. \u201cEsta nueva funci\u00f3n para nuestro kit<\/em> es el resultado de un trabajo concluido recientemente y cuyos resultados nos han sorprendido\u201d, dice la bi\u00f3loga. Ya se deposit\u00f3 una patente sobre el kit<\/em> en Estados Unidos y en los principales pa\u00edses europeos, y tambi\u00e9n, a partir de 2001, en el Instituto Nacional de la Propiedad Intelectual (INPI).<\/p>\n

En los laboratorios de Proteobras, cuya facturaci\u00f3n anual es de 200 mil reales, mediante la producci\u00f3n de reactivos de rutina para los laboratorios que trabajan con prote\u00ednas y ADN, el desarrollo del kit<\/em> de diagn\u00f3stico se encuentra en una etapa avanzada. \u201cNuestro objetivo consiste en producir una mol\u00e9cula que reconozca a esa enzima conversora de angiotensina I, tal como si fuera un anticuerpo. Pero, para desarrollar esa mol\u00e9cula \u2013 que es una prote\u00edna recombinante \u2013 es necesario antes contar con grandes cantidades de la enzima. Ese material se produce en laboratorio mediante t\u00e9cnicas de clonaci\u00f3n\u201d, afirma Jo\u00e3o Bosco. \u201cYa hemos clonado la enzima conversora y ahora nos encontramos en fase de expresi\u00f3n y purificaci\u00f3n. Luego iniciaremos la producci\u00f3n de los anticuerpos para su uso en el kit<\/em>\u201d.<\/p>\n

\"Prototipo

EDUARDO CESAR<\/span>Prototipo del kit compuesto con prote\u00edna recombinante que funciona como marcador de la hipertensi\u00f3nEDUARDO CESAR<\/span><\/p><\/div>\n

Insumos innovadores
\n<\/strong>El desarrollo del kit<\/em> de diagn\u00f3stico para la hipertensi\u00f3n es uno de los proyectos de Proteobras, una empresa creada en 2004, en Mogi das Cruzes (S\u00e3o Paulo), para abastecer al mercado brasile\u00f1o con prote\u00ednas recombinantes de inter\u00e9s socioecon\u00f3mico y comercial, y que, hasta ese entonces, s\u00f3lo llegaban importadas. Pasados siete a\u00f1os, ese mercado a\u00fan es incipiente en el pa\u00eds y pocas empresas nacionales dominan la tecnolog\u00eda de producci\u00f3n. A nivel mundial, el negocio relacionado con los reactivos, que abarca a las investigaciones con prote\u00ednas, ADN y biolog\u00eda celular, totaliza 42 mil millones de d\u00f3lares anuales y llegar\u00e1 a unos 81 mil millones en 2016, seg\u00fan un estudio publicado en abril de este a\u00f1o por la empresa estadounidense BCC Research de investigaci\u00f3n de mercado.<\/p>\n

\u201cBrasil representa un mercado enorme, aunque reprimido. Resulta complicado establecer su tama\u00f1o, ya que todas las \u00e1reas del conocimiento, sectores de la econom\u00eda y actividades que involucran a humanos y otros animales pueden hacer uso de estos productos\u201d, dice Jo\u00e3o Bosco. Las prote\u00ednas recombinantes cuentan con aplicaciones en los campos de la salud, biolog\u00eda, bioqu\u00edmica, biotecnolog\u00eda, microbiolog\u00eda y agricultura, entre otros. Los laboratorios de an\u00e1lisis cl\u00ednicos utilizan este material en diversos ex\u00e1menes y tratamientos de ciertas enfermedades gen\u00e9ticas, tales como las enfermedades relacionadas con el proceso de coagulaci\u00f3n en hemof\u00edlicos y errores innatos del metabolismo. \u201cOtro factor que limita el uso de recombinantes es la dificultad de obtenci\u00f3n y purificaci\u00f3n de la prote\u00edna. El proceso presenta varias etapas y un elevado grado de dificultad\u201d, dice Jo\u00e3o Bosco. Para \u00e9l, \u201cel pa\u00eds cuenta actualmente con una cantidad muy peque\u00f1o de profesionales experimentados en t\u00e9cnicas que involucran prote\u00ednas, lo cual dificulta el avance en el sector\u201d.<\/p>\n

Proteobras ya domina el proceso de producci\u00f3n, que comienza con la definici\u00f3n de la prote\u00edna de inter\u00e9s que se pretende producir. El primer paso es el aislamiento del ADN que se emplear\u00e1 y que puede extraerse de la sangre o de la saliva de un individuo que posea la prote\u00edna. Luego, es necesario multiplicar el n\u00famero de copias de este ADN \u2013 un proceso denominado por los cient\u00edficos como amplificaci\u00f3n \u2013 mediante el uso de la t\u00e9cnica de reacci\u00f3n en cadena de la polimerasa (PCR, su sigla en ingl\u00e9s). Una vez hecho esto, puede comenzarse con el clonado del ADN, que es injertado en un vector de clonado o expresi\u00f3n, originando un vector recombinante. El vector es una especie de matriz molecular que sirve como soporte para el ADN de inter\u00e9s. Ese vector recombinante se inserta dentro de un organismo \u2013 una bacteria, una levadura, una c\u00e9lula de mam\u00edfero, de insecto o de una planta \u2013, que funcionar\u00e1 como un birreactor, donde la prote\u00edna ser\u00e1 producida, o expresada, en la jerga cient\u00edfica. La elecci\u00f3n del organismo depende de factores tales como la cantidad, el costo, el tipo de mol\u00e9cula que se desea clonar y su aplicaci\u00f3n. A continuaci\u00f3n, el organismo es colocado en una placa con antibi\u00f3tico, que matar\u00e1 a aqu\u00e9llos que no incorporen el ADN, dejando solamente a los organismos positivos, resistentes al antibi\u00f3tico. \u00c9sta constituye la etapa de selecci\u00f3n. Los clones positivos son aislados y multiplicados en un medio de cultivo. Al final del proceso, el organismo expele la prote\u00edna y los cient\u00edficos proceden a la purificaci\u00f3n de la sustancia. \u201c\u00c9sa es la parte m\u00e1s importante del proceso, que puede realizarse separando la prote\u00edna por tama\u00f1o o por carga el\u00e9ctrica, entre otros m\u00e9todos\u201d, explica el profesor de la Unifesp.<\/p>\n

\"078-081_DNA<\/a>Adem\u00e1s de las mol\u00e9culas todav\u00eda en fase de desarrollo, Proteobras comenzar\u00e1 a comercializar en noviembre dos nuevos productos para la comunidad cient\u00edfica: una polimerasa de ADN y un patr\u00f3n de masa molecular del ADN. La polimerasa es una enzima con inter\u00e9s biotecnol\u00f3gico por sus aplicaciones en diagn\u00f3sticos, utilizada tanto en el proceso de amplificaci\u00f3n del ADN \u2013 durante la producci\u00f3n de prote\u00ednas recombinantes \u2013, por ejemplo, como en los test de paternidad y otros ex\u00e1menes moleculares realizados por laboratorios de an\u00e1lisis cl\u00ednicos y hospitales. El patr\u00f3n de masa muscular tambi\u00e9n se emplea para el desarrollo de prote\u00ednas recombinantes y sirve para indicar si el tama\u00f1o del fragmento de ADN que ser\u00e1 clonado y seleccionado por el investigador es correcto, por ende, con amplia aplicaci\u00f3n para la biolog\u00eda molecular. Seg\u00fan Jo\u00e3o Bosco, este insumo no era hasta ahora fabricado en Brasil.<\/p>\n

Para posibilitar el desarrollo de nuevas mol\u00e9culas, Proteobras ha contado, desde su creaci\u00f3n, con recursos provenientes de organismos de fomento de la investigaci\u00f3n. La primera financiaci\u00f3n p\u00fablica, obtenida en 2005, fue en el marco de un Pipe, por valor de 75 mil reales, cuyo objetivo consist\u00eda en establecer un protocolo de producci\u00f3n de la hormona fol\u00edculo estimulante\u00a0 (FSH) bovina para su aplicaci\u00f3n en casos de superovulaci\u00f3n, una t\u00e9cnica que apunta al aumento y a la mejora del reba\u00f1o. En 2009, la empresa obtuvo una financiaci\u00f3n por valor de 390 mil reales en el marco del Programa de Subvenci\u00f3n Econ\u00f3mica de la Financiadora de Estudios y Proyectos (Finep) para crear un protocolo de producci\u00f3n de algunas prote\u00ednas recombinantes y desarrollar estudios de caracterizaci\u00f3n de prote\u00ednas.<\/p>\n

Con fuerte esp\u00edritu emprendedor, Jo\u00e3o Bosco Pesquero tambi\u00e9n colabora en el montaje de la empresa Exxtend, creada en octubre de este a\u00f1o mediante una asociaci\u00f3n entre Proteobras y el grupo alem\u00e1n K&A. El objetivo del nuevo emprendimiento consiste en ofrecer ciertos reactivos b\u00e1sicos denominados oligonucle\u00f3tidos, muy utilizados por los investigadores en biolog\u00eda molecular y diagn\u00f3sticos en el \u00e1rea de la salud. Sus principales usuarios son los laboratorios de investigaci\u00f3n, cl\u00ednicas m\u00e9dicas, hospitales, institutos de investigaci\u00f3n y laboratorios privados. La empresa alemana, presente en 80 pa\u00edses, es la segunda productora del insumo a nivel mundial. Ella aport\u00f3 la tecnolog\u00eda y suministr\u00f3 parte de los aparatos utilizados para la s\u00edntesis de los oligonucle\u00f3tidos. \u201cActualmente no hay una empresa productora de oligos en el pa\u00eds, solamente representantes de grupos extranjeros. Estos reactivos se importan desde Europa, Estados Unidos y Asia, y tardan, en promedio, entre 15 y 20 d\u00edas para llegar a las manos de los investigadores\u201d. Exxtend ofrecer\u00e1 el producto en peque\u00f1os frascos que se enviar\u00e1n por correo en alrededor de dos d\u00edas a sus clientes. De acuerdo con Jo\u00e3o Bosco, no existen datos precisos sobre el mercado de oligonucle\u00f3tidos en Brasil, aunque las estimaciones apuntan que la demanda del reactivo ser\u00e1 del orden de 200 mil a 300 mil unidades anuales. De comercializarse todo ese material, la empresa facturar\u00e1 7 millones de reales, puesto que cada oligo cuesta alrededor de 25 reales. \u201cCon Proteobras y Exxtend, pretendemos producir diversos insumos para la investigaci\u00f3n en el pa\u00eds que actualmente s\u00f3lo llegan importados\u201d, dice Jo\u00e3o Bosco.<\/p>\n

El proyecto
\n<\/strong>Desarrollo del kit<\/em> diagn\u00f3stico de hipertensi\u00f3n por medio de marcadores moleculares involucrando a la enzima conversora de angiotensina e isoformas (n\u00ba 2009\/51574-1<\/a>); Modalidad <\/strong>Investigaci\u00f3n Innovadora en Peque\u00f1as Empresas (Pipe);\u00a0Coordinador\u00a0<\/strong>Paulo Roberto Pesquero \u2013 Proteobras; Inversi\u00f3n\u00a0<\/strong>R$ 280.000,00\u00a0 (FAPESP)<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"Una empresa invierte en el desarrollo de insumos para la investigaci\u00f3n","protected":false},"author":23,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"_exactmetrics_skip_tracking":false,"_exactmetrics_sitenote_active":false,"_exactmetrics_sitenote_note":"","_exactmetrics_sitenote_category":0,"footnotes":""},"categories":[1561,192],"tags":[280,281,294,306,316],"coauthors":[116],"class_list":["post-90562","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-programa-de-innovacion-tecnologica-en-pequenas-empresas-pipe","category-tecnologia-es","tag-bioquimica-es","tag-biotecnologia-es","tag-economia-es","tag-genetica-es","tag-medicina-es"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/90562","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/users\/23"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=90562"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/90562\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=90562"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=90562"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=90562"},{"taxonomy":"author","embeddable":true,"href":"https:\/\/revistapesquisa.fapesp.br\/es\/wp-json\/wp\/v2\/coauthors?post=90562"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}