El siempre desagradable pinchazo de una aguja puede desaparecer para ciertos tipos de diagnóstico al cambiárselo por una pequeña porción de saliva, en un procedimiento menos invasivo e indoloro si se lo compara con los análisis de sangre. La saliva se perfila para una serie de usos, en test ya comercializados o en estudio, en varios países, para identificar hormonas, cáncer y más recientemente medir el nivel de estrés. En Brasil, la empresa Probiotec, instalada en el Centro de Incubación de Actividades Emprendedoras (Ciaem) de la Universidad Federal de Uberlândia (UFU), en Minas Gerais, está listo para iniciar la producción de kits utilizando la saliva como fuente para el diagnóstico. La empresa, que también forma parte del Arreglo Productivo Local (APL) de Biotecnología de Triângulo Mineiro, fue fundada por el profesor Foued Salmen Espindola, del Instituto de Genética y Bioquímica de la UFU y dos biólogos que concluyeron la maestría en el Programa de Posgrado en Genética y Bioquímica de la institución, Leonardo Gomes Peixoto y Rogério de Freitas Lacerda.
Los primeros y comprobados productos que ellos pretenden comercializar, tan pronto como salgan los registros en la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria (Anvisa), son dos kits que utilizan la saliva como fuente de biomarcadores del ejercicio físico y del estrés psicológico, principalmente en situaciones vinculadas al deporte. “Nosotros usamos la dosis proteína total de la saliva y la actividad de la enzima alfa-amilasa salivar”, dice Espindola. Uno de los objetivos del desarrollo de estos kits es ofrecer una simplificación, con innovación tecnológica, para determinar el umbral anaeróbico que es definido por la relación del consumo de oxigeno y el aumento continuo del lactato sanguíneo durante un teste de ejercicio físico como el teste de estera o de bicicleta ergométrica. La medida de ese umbral de lactato es importante en la fisiología del ejercicio, en la medicina deportiva, en la educación física y para atletas de varias modalidades deportivas. “Ese umbral puede ser también determinado por el análisis de la saliva. De ese modo, podemos ofrecer un diagnóstico bioquímico de adaptación metabólica y de la resistencia a la fatiga.”
Actualmente se utiliza la concentración de lactato sanguíneo como indicador de ese umbral y el teste puede ser hecho de dos formas, una con la respuesta en el local de la colecta, utilizando la lectura de una cinta impregnada con sangre colectada de la punta del dedo y otra que requiere el transporte de la sangre colectada del lóbulo de la oreja en pequeños tubos y analizado en un laboratorio con equipamientos específicos y caros. Son dos métodos invasivos porque exigen la retirada de sangre y causan dolor, incómodos que el empleo de la saliva elimina.
Innúmeros trabajos relatados en la literatura científica reciente y realizados en los laboratorios de la UFU y por la Probiotec indican la medida de la actividad de la alfa-amilasa como un biomarcador interesante y de gran potencial para evaluar el estrés físico y psicológico. “Es posible hasta que su determinación en la saliva pueda ser un marcador efectivo del estrés capaz de sustituir los análisis de los niveles hormonales de adrenalina y cortisol, que también están relacionados con ese estado físico y mental. Las alfa-amilasas son producidas por el páncreas y glándulas salivares, siendo responsables por la digestión de carbohidratos. En la saliva esta enzima está asociada a otras funciones importantes para la salud bucal, y cuando es extraída de la sangre puede mostrar alteraciones anormales asociadas con patologías en el páncreas.”
Vasos y tubos – La realización de los nuevos exámenes puede ser hecha utilizando la saliva colectada después de la higienización bucal y estimulada por la breve masticación de un pedazo de algodón, parafina, pedazo de plástico en forma de película utilizado en embalajes y hasta de una goma de mascar sin azúcar. Después de la masticación por dos o tres minutos se desprecia la primera saliva y se colecta la siguiente en un vaso (el vasito plástico de café es el ideal) o por un dispositivo que consiste en un pequeño tubito de celulosa o poliéster que estará disponible con el kit de la colecta. La saliva puede entonces ser transferida para un pequeño tubo plástico y ser enviada el mismo día de la colecta para el laboratorio, hasta por el correo, no necesitando condiciones de refrigeración. Como en el caso de la colecta de sangre para análisis del lactato sanguíneo, la saliva debe ser colectada inmediatamente antes, durante y aproximadamente 15 minutos después de la realización del teste de ejercicio físico porque los niveles de proteína total y amilasa salivar tienden rápidamente a volver a los niveles de reposo. Además de producir el kit, la Probiotec también va a hacer el análisis del material y emitir laudos.
La práctica del uso de la saliva en diagnósticos está siendo difundida en Estados Unidos, donde son ofrecidos kits para exámenes de detección del nivel de hormonas masculinas y femeninas además del cortisol. Muchos grupos de investigación en todo el mundo apuestan en el estudio de la saliva para otros tipos de diagnóstico. “En el Japón, un grupo liderado por el profesor Masaki Yamaguchi, de la Facultad de Ingeniería Toyama, desarrolló y está probando un aparato de uso portátil como un palm que mide (como en los ya tradicionales testes de glucosa) la amilasa en una cinta de papel. Él es indicado para su uso en testes de estrés psicológico, principalmente en situaciones que exigen la medición en el propio local, como hacer el diagnóstico de un motorista de ómnibus, por ejemplo, a lo largo del día”, cuenta Espindola. “En Suiza, el profesor Urs Markus Nater, del Instituto de Psicología de la Universidad de Zurich, testa una serie de exámenes psicológicos con amilasa que involucran situaciones de violencia y como marcador biológico en sesiones de terapia para que el psicólogo perciba si el paciente está estresado.”
Trabajos recientes relativos a la proteómica de la saliva, que tienden a identificar a todas las proteínas de ese fluido corporal, pueden abrir caminos para nuevos tipos de exámenes. “Ya fueron catalogadas en esos estudios proteómicos más de 300 proteínas en la saliva. Se pensaba antes en un número mucho menor de proteínas salivares. Esos descubrimientos van a ser muy importantes para el desarrollo de diagnósticos para las enfermedades humanas.” Al inicio de este año, investigadores de la Universidad de Texas, en Estados Unidos, anunciaron un examen con saliva para identificar proteínas vinculadas al cáncer de mama. Sería una forma de detectar la enfermedad precozmente. Espindola habla también del potencial de la saliva para el diagnóstico de cáncer bucal, polimorfismos genéticos, para identificar moléculas y drogas que una persona ingirió, incluso el dopaje en atletas, y en la toxicología forense. Con tantas posibilidades y perspectivas biotecnológicas del uso de la saliva como medio para diagnóstico es que se prevea que la Probiotec tendrá mucho trabajo por delante. “Además de los aspectos científicos y tecnológicos que nosotros dominamos, tenemos apoyo del Consejo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico (CNPq), por medio del Programa de Capacitación de Recursos Humanos para Actividades Estratégicas (RHAE) de 2005, que concedió tres becas de investigación, del Ciaem, del Servicio Brasileño de Apoyo a las Micro y Pequeñas Empresas (Sebrae), en la formulación del negocio y en la captación de recursos financieros, y de la Financiera de Estudios de Proyectos (Finep), que, por medio de la Fundación de Amparo a la Investigación del Estado de Minas Gerais (Fapemig), aprobó un proyecto del Programa de Apoyo a la Investigación en Empresas (Pappe), que ha financiado gran parte de nuestras investigaciones en la empresa”, cuenta Espindola.
Los proyectos
1 – Biomarcadores salivales para la evaluación del estrés
2 – Desarrollo de kits para diagnósticos de biomarcadores salivales
Modalidad
1 – Programa de Apoyo a la Investigación en Empresas (Pappe)
2 – Rhae Innovación
Coordinador
Foued Salmen Espindola – UFU/ Probiotec
Inversión
1 -177.057,79 reales (Finep/Fapemig)
2 – 78.000,00 reales (MCT-CNPq)
